2024-03-21 14:53:00

一、血清沉淀 

血清在融解过程中会产生大量的析出物,呈现出小颗粒样的东西,甚至呈纤维样,这是由于血清融解后导致的蛋白、盐类物质的析出。血清静置融解不混匀,即会出现小黑点。

                        血清融解时混匀                              血清静置融解不混匀,出现黑点

                                         

 

                                         显微镜下的血清沉淀物

 

影响因素

通常血清析出物的多少与融解方法有关。通过4℃冰箱解冻和溶解过程持续摇晃混匀,可以有效避免沉淀产生,而37℃静置混匀则会有较多沉淀物析出。

处理方法

血清沉淀产生后应离心去除部分沉淀,否则在培养细胞时会看到较多黑点和杂质类物质,影响判断。

 

 

二、细胞碎片或者分泌物 

 

在细胞代谢过程中,细胞凋亡后会产生一些分泌物的沉积和碎片物质,在显微镜下呈黑点状。

           显微镜下的细胞碎片及分泌物

特征

①细胞碎片大小不均一,会随着培养时间少量增多,但是不会呈倍增的趋势增多;

②细胞状态差时碎片会较多,状态变好后黑点减少

③细胞分泌物情况根据细胞有区别,有的细胞不产生分泌物,有的细胞会有较多的分泌物,往往是不影响细胞形态和增殖速度

 

三、外源微生物污染

 当细胞被支原体、黑胶虫或者细菌污染时,往往也会产生很多小黑点,尤其是细菌污染的情况出现时,这些小黑点甚至会导致培养液浑浊。

细胞支原体污染,黑点较多

细胞加入支原体清除试剂第二天,黑点显著变少

 

如何区分是否为污染?

1外源微生物污染

支原体和黑胶虫污染一般表现为黑点增多并伴随细胞生长速度变慢、死细胞增多等现象,通常加入对应清除试剂后细胞状态会有显著改善。

2细胞分泌物/细胞碎片

细胞分泌物和细胞碎片则不会因为加入清除试剂后而改善,会持续存在且不影响细胞增长。

 

 

 

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