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细胞及流式检测样本准备方法及要求
1、活细胞运输方法
用不透气培养瓶培养细胞,待细胞汇合度达到70%左右时,灌满新鲜培养基至接近瓶口处,拧紧瓶盖,封口膜进一步封住瓶口。瓶身上做好标记(细胞名称,培养基,日期等)。打包时用泡沫包裹好做防震处理。
2、冻存细胞运输方法
一定要保证干冰充足,冻存管确保被干冰完全覆盖。切勿冻融。
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石蜡切片与冰冻切片如何选择?
1、常规染色,组化或是荧光优先推荐做石蜡切片。
2、脂质染色(油红O染色,bodipy染色,尼罗红染色)必须做冰冻切片,不能做石蜡切片。
3、以下染色必须要新鲜或冷冻组织冰冻切片:ROS染色,b-半乳糖甘酶染色,ATP染色,胆固醇染色。
4、如果标本已经放在-80°冰箱冷冻了之后又想要做石蜡切片,将标本取出来千万不要解冻直接放于固定液内固定(在固定液内边解冻边固定)。
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银屑病动物模型的介绍和建立
银屑病是一种具有多基因遗传特性的疾病,发病机制尚不完全清楚,现有研究认为,它与感染、内分泌机能障碍、免疫功能紊乱、酶的改变及遗传因素有关。其临床特征是不同部位皮肤反复出现红斑、丘疹、斑丘疹,具同形反应、奥斯皮茨征(Auspitz sign)和薄膜现象。
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RAW264.7诱导分化成破骨细胞
RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)是破骨细胞、炎症研究最常用的体外模型之一,被广泛用于研究风湿性关节炎、骨质疏松症、骨质溶解、牙周炎等骨骼疾病。
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Western blot 实验内参的作用以及如何选择
Western Blot即免疫印迹试验,可以利用Western Blot来比较在不同条件下,不同细胞组织中目的蛋白表达量的差异,属于定性,半定量试验内参一般选用管家基因表达的蛋白,它们在各个组织细胞中表达相对恒定,不会因为外部条件变化而引起表达量的变化。而且内参可以监测整个试验体系是否正常,比如蛋白提取过程,转膜体系,显色体系等。